产品货号：
MT2004
中文名称：
探针法qPCR预混液
英文名称：
2×BAPA3G Probe qPCR Mix
产品规格：
100T|500T|2500T
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品将热启动BAPA3G DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP染料等试剂预混在一起，是一种2×浓度的单组分预混试剂。该制品不含有ROX校正染料，适用于各种荧光标记探针，并且适用于各种定量PCR机型。优化的反应缓冲液，使得本制品可用于1～2重的探针法定量PCR。
本制品中的BAPA3G DNA聚合酶为第三代DNA聚合酶，其具有最高的杂质耐受性，其对乙醇、胍盐、肝素、血清、植物多糖多酚具有极高的耐受性，因此可用于粗样品的直接定量PCR检测(Direct PCR)。该酶经化学法修饰，在50℃以下100%无活性，只有95℃条件下加热5min后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增，极大的提高了PCR扩增特异性。
| 组分 | 100T | 500T | 2500T |
| 2×BAPA3G Probe qPCR Mix | 1mL | 1mL×5 | 25mL |
| 说明书 | 1份 | ||
保存：-20℃避光，有效期3年。
- 配制qPCR反应体系：按下表加入各成分配制20μL PCR反应体系
成分 用量 终浓度 2×BAPA3G Probe qPCR Mix 10μL 1× Primer F1 (20μM) 0.1～0.4μL 0.1～0.4μM Primer R1 (20μM) 0.1～0.4μL 0.1～0.4μM Probe1 (20μM) 0.1～0.4μL 0.1～0.4μM 其它引物和探针 x μL DNA模板 0.5～2μL ddH2O 至20μL - qPCR反应程序
- 两步法：进行Real-Time PCR反应，通常采用两步法，程序如下：
温度 时间 循环数 说明 95℃ 5min 1 热启动 95℃ 5s 40 变性 60℃ 30s 退火/延伸，收集信号 - 退火/延伸温度可在55～65℃调整。
- 三步法：在多数情况下，采用两步法程序可获得理想的扩增效果，在无法达到预期理想效果的情况下，也可采用三步法PCR程序，程序如下：
温度 时间 循环数 说明 95℃ 5min 1 热启动 95℃ 5s 40 变性 55℃ 10s 退火 72℃ 30s 延伸，收集信号
- 两步法：进行Real-Time PCR反应，通常采用两步法，程序如下：
- 反应结束后确认Real-Time PCR的扩增曲线和标准曲线。
BAPA3G DNA聚合酶对抑制物耐受性：
| SDS | 0.01% | Serum | 2% |
| EtOH | 5% | Plasma Citrate | 2% |
| Heparin | 0.1IU/ml | Gua SCN | 0.25% |
| Hematin | 30μM | Trizol | 0.5% |
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